李菲
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所 在 地北京市
更新時間:2023-07-18 18:41:06瀏覽次數(shù):6390次
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菌落總數(shù)的快速測定方法 適用范圍:可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定肪瘤。也可用于與食品接觸的容器、操作臺和其他設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測潮瓶。
菌落總數(shù)的快速測定方法
1 適用范圍 : 可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定 陶冷。 也可用于與食品接觸的容器 、 操作臺和其他設(shè)備表
面的衛(wèi)生檢測毯辅。
2 方法原理:將營養(yǎng)培養(yǎng)基埂伦、凝膠和氯化三苯基四氮唑( TTC )顯色劑等加載在試紙片,經(jīng)加樣思恐、培養(yǎng)后沾谜,
細(xì)菌菌落在測試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑,通過計數(shù)報告結(jié)果胀莹。
3 操作方法
3.1 樣品處理 : 無菌稱取樣品 25g ( 或 25mL ) 放入含有 225mL 無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi) 基跑, 經(jīng)充分
振搖 ( 均質(zhì) ) 做成 1:10 的稀釋液 婚温。 用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL , 注入含有 9mL 滅菌生理鹽水的試
管內(nèi) 媳否, 用 1mL 滅菌吸管反復(fù)吸吹制成 1:100 的稀釋液 栅螟。 以此類推 , 做出 1:1000 等稀釋度的稀釋液 篱竭, 每個稀釋
度更換一支滅菌吸管力图。
3.2 接種:一般食品選 2 ~ 3 個稀釋度進(jìn)行檢測,含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用
原液檢測 芭贬。 將測試片放在水平臺面上 恋都, 揭開上面的透明薄膜 处膛, 用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液 1mL 坚呜, 均勻
加到中央的紙片上,輕輕將上蓋膜放下胆抓,靜置 5 min 使培養(yǎng)基凝固闸虹,zui后用手輕輕地壓一下。每個稀釋度接
種兩片辽察。
3.3 培養(yǎng) : 將測試片疊在一起放回原自封袋中 敌痴, 透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi) , 堆疊片數(shù)不超過 12 片 腰步。
培養(yǎng)溫度為 36 ℃± 1 ℃ 溪臊,培養(yǎng) 15 ~ 24h 。
4 結(jié)果判斷與計數(shù):
4.1 細(xì)菌在紙片上生長后會顯示紅色斑點 堆鸦, 選擇菌落數(shù)適中 ( 10 個~ 100 個 ) 的紙片進(jìn)行計數(shù) 镊鹊, 乘以稀釋倍
數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在 100 以內(nèi)時烛芬,按實有數(shù)報告隧期。大于 100 時 ,
用二位有效數(shù)字赘娄,二位有效數(shù)字后面的數(shù)字仆潮,以四舍五入方法計算,并以 10 的指數(shù)來表示遣臼。
4.2 計數(shù)原則與報告方式
4.2.1 通常選擇菌落在 10 個~ 100 個之間的紙片進(jìn)行計數(shù)性置,乘以稀釋倍數(shù)報告之(見下表中例次 1 ) 。國家
標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)報告方式術(shù)語為 cfu/g 或 mL 揍堰, cfu 的含義為菌落形成單位蚌讼。
4.2.2 若有兩個稀釋度的菌落數(shù)在 10 個~ 100 個之內(nèi),兩者的比值小于 2 个榕,則取其平均數(shù)篡石,若大于 2 芥喇,則采
用稀釋度小者報告。
4.2.3 若三個稀釋度的菌落數(shù)都有在 10 個~ 100 個之內(nèi)時凰萨,應(yīng)選擇二個低數(shù)值的平均數(shù)继控。
4.2.4 若三個稀釋度的菌落數(shù)均小于 10 個或大于 100 個時 , 應(yīng)重新試用更低或更高的稀釋度進(jìn)行菌落計數(shù) 笤碍;
或采用均小于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui小值况饥,或采用均大于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui大值。
5 表面取樣方法 : 加 1mL 滅菌生理鹽水在測試片上 支赖, 靜置至少 1h 使培養(yǎng)基凝固 荸冒; 提起上層膜 , 使中央濾紙
部分貼到待測物表面访跪,用手在外側(cè)輕壓扬饰;然后將上蓋膜合上,置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)化威。
6 注意事項:使用過的紙片上帶有活菌班跟,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
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