黃曲霉毒素B₁速測卡使用說明書

方法編號：CDC-5512

1.適用范圍與檢測意義：本品適用于谷物面旋、飼料摇龟、食用油、調(diào)料和發(fā)酵酒等物質(zhì)中黃曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁簡寫為AFB₁）的快速檢測吟沮。黃曲霉毒素B₁是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性很強(qiáng)的一種遮乾，對人和若干動物具有強(qiáng)烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害刹勃。黃曲霉毒素B₁是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一堪侯。

2.測定原理：本品采用高度特異性抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，通過單克隆抗體競爭結(jié)合AFB₁-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB₁的原理荔仁。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)（T）的AFB₁-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗AFB₁單克隆抗體伍宦。檢出限為5ng/ml。

3.所用器皿：常量天平±0.1g乏梁；蒸發(fā)皿或燒杯次洼；量筒关贵；滴管；移液管卖毁；小型粉碎機(jī)揖曾；離心機(jī)等。

4.樣品制備

4.1谷物與飼料：取5g以上有代表性樣品并充分粉碎亥啦，準(zhǔn)確稱取2.0g均勻試樣于15ml離心管中炭剪，向離心管中準(zhǔn)確加入2ml純凈水和8.0ml的乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封禁悠，充分振蕩5min念祭，4000rpm離心1分鐘，將上清液用吸管吸出2.0ml到小玻璃杯中撤筐，用電吹風(fēng)吹干液體裙系，根據(jù)不同樣品對黃曲霉毒素B1（AFB₁）的*要求不同，參考下表將不同體積的稀釋液加入到已吹干的杯子中午伍，用吸管反復(fù)沖洗杯底和杯壁眼膊，使殘?jiān)?溶解，此溶解液即為樣品檢測液傲轮。

4.2食用油：稱取2.0g油樣于小燒杯中舆鸿，用8ml正己烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，準(zhǔn)確加入4ml純凈水充分振蕩3min,吸去上層正己烷層,再加入4ml的乙酸乙酯百膳，將瓶塞蓋緊密封翰发，充分振蕩5min，靜置或離心得上清液冀态，將上清液吸出2ml到小玻璃杯中吮骑，用電吹風(fēng)吹干，參照表格赋遇，根據(jù)AFB₁*循头，量取相應(yīng)體積稀釋液復(fù)溶杯底固體。此溶解液即為檢測液炎疆。

4.3醬油卡骂、醋：準(zhǔn)確量取2.0ml樣品于15ml離心管中，準(zhǔn)確加入4.0ml乙酸乙脂形入，塞緊瓶塞后充分震蕩5min全跨，靜置1~2min，待溶液分層以后將上清夜用移液槍（或移液管亿遂，吸管）全部轉(zhuǎn)移到另一只15ml離心管中螟蒸，加入2.0ml 0.05M Na₂CO3溶液，充分震蕩3min崩掘，用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中七嫌，吹干濾液少办，參照表格，根據(jù)AFB₁*诵原，量取相應(yīng)體積稀釋液復(fù)溶杯底固體英妓。此溶解液即為檢測液。

4.3發(fā)酵酒：準(zhǔn)確量取2.0ml樣品于15ml離心管中呈篱，準(zhǔn)確加入4.0ml乙酸乙脂，塞緊瓶塞后充分震蕩5min伐狼，靜置1~2min臣塑，待溶液分層以后用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中，吹干濾液岁十，參照食用油樣品制備表格特干，根據(jù)AFB₁*，量取相應(yīng)體積稀釋液復(fù)溶杯底固體惦踩。此溶解液即為檢測液涨剧。

5測定

5.1 使用前將試紙卡和待檢樣本溶液恢復(fù)至室溫。

5.2 從原包裝袋中取出試紙卡敲骏，打開后平放在桌面上樊淑，在1小時(shí)內(nèi)盡快地使用。

5.3 用滴管吸取待檢樣品溶液蝇降，滴加3滴于加樣孔中铜缠，加樣后開始計(jì)時(shí)。

5.4 結(jié)果應(yīng)在5min時(shí)讀取饵骨，超過10min的時(shí)間判讀無效翘悉。

6結(jié)果判定

6.1陽性：C線顯色，T線不顯色宏悦，判為陽性镐确。

6.2陰性：C線顯色包吝，T線肉眼可見饼煞，無論顏色深淺均判為陰性。

6.3無效：C線不顯色诗越，無論T線是否顯色砖瞧，該試紙均判為無效。

7說明

7.1本品為一次性產(chǎn)品嚷狞，勿重復(fù)使用块促。

7.2如遇稀釋液不足，可用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用床未。

7.3本品為篩選方法竭翠，任何陽性結(jié)果請用其它方法作進(jìn)一步確認(rèn)振坚。

7.4有條件的實(shí)驗(yàn)室可以用AFB1標(biāo)準(zhǔn)品作為判斷參考。

7.5本品應(yīng)保存在干燥陰涼處（4-30℃）祠劣，有效期18個(gè)月秤淀。

8包裝：試紙卡5片，稀釋液1瓶耗萝，15ml離心管1支世荐。