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當(dāng)前位置：北京天安聯(lián)合科技有限公司>>水質(zhì)試劑盒/檢測管>> 菌落總數(shù)測試卡片
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更新時(shí)間：2023-07-18 07:52:00瀏覽次數(shù)：6445次
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菌落總數(shù)測試片
| 目 錄 一鹰党、 適用范圍 二炫茄、 實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作及操作中的注意事項(xiàng) 三、 生活飲用水微生物常規(guī)指標(biāo)及限值 四钓藏、 檢測流程圖 五状奴、 菌落總數(shù)測試片使用說明 六、 飲用水大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說明 七精臭、 水質(zhì)大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說明 八耗憨、 大腸菌群檢測試劑盒使用說明 九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片使用說明 十摇祖、 致病菌檢測試劑盒使用說明 十一眷篇、沙門氏菌測試片使用說明 十二、金黃色葡萄球菌測試片使用說明 十三荔泳、副溶血弧菌測試片使用說明 十四蕉饼、大腸桿菌O157測試片使用說明 十五、阪崎腸桿菌測試片使用說明 十六玛歌、蠟樣芽胞桿菌測試片使用說明 一椎椰、適用范圍 適用于生活飲用水及其水源水生指標(biāo)菌與致病菌的日常監(jiān)測以及應(yīng)急檢測需要厦幅。 二、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作及操作中的注意事項(xiàng) 1 開展微生物快速檢測所需的基本條件 1.1 一間通風(fēng)良好慨飘、面積不需要很大的獨(dú)立房間确憨，房間里備有紫外線消毒燈，洗手盆瓤的，實(shí)驗(yàn)臺(tái)休弃。應(yīng)急檢測時(shí)，臨時(shí)性的房間應(yīng)注意工作環(huán)境的的消毒（如采用84消毒液消毒等）圈膏，并備好酒精燈塔猾。 1.2 一臺(tái)高壓鍋或紅外線消毒柜（家用消毒碗柜也可。）應(yīng)急檢測時(shí)稽坤，應(yīng)備好消毒液永炭，含氯消毒液的濃度在250ppm時(shí)，器皿消毒應(yīng)保持5分鐘以上土嚼。 1.3 一臺(tái)小型恒溫培養(yǎng)箱魏桅； 1.4 有條件時(shí)，配備一臺(tái)普通冰箱缓缝，用于存放樣品钳葬； 1.5 水質(zhì)微生物采樣檢測箱，箱內(nèi)備有采樣用具與實(shí)驗(yàn)用的一些工具和器皿赂品； 1.6 檢測用試紙與試劑盒翩腹。 2 移液器的消毒 2.1 移液器管頭的消毒：將管頭放入錫箔袋或用錫箔紙包好，放入民用紅外線消毒柜中消毒誓豺；或?qū)⒐茴^放入消毒液中浸泡刷裂，取用時(shí)注意甩干消毒液并用無菌生理鹽水沖洗三次。 3. 無菌操作和注意事項(xiàng) 3.1點(diǎn)燃酒精燈吏恃，營造局部無菌環(huán)境米萝。取樣和加樣時(shí)盡量靠近酒精燈操作揣蒿。能用火焰消毒的操作工具如鑷子嚎猛、剪子、長柄勺篡撵、小刀等應(yīng)在酒精燈上消毒后使用褐着。 3.2 用75%酒精棉球?qū)⑹帜ú料尽?/span> 3.3 廢棄物及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 坷澡。 三、生活飲用水微生物常規(guī)指標(biāo)及限值 根據(jù)國家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB 5749—2006）含蓉，常規(guī)的微生物指標(biāo)及限值如下：
MPN表示zui可能數(shù)频敛；CFU表示菌落形成單位。當(dāng)水樣檢出總大腸菌群時(shí)馅扣，應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群斟赚；水樣未檢出總大腸菌群着降，不必檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群。 四拗军、檢測流程圖 五任洞、菌落總數(shù)測試片使用說明 1 原理及適用范圍：菌落總數(shù)是指樣品經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后所得1mL（g）檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù)发侵，是zui常用的檢測項(xiàng)目指標(biāo)交掏。菌落總數(shù)測試片（Aerobic Count Plates BB202）是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有標(biāo)準(zhǔn)的營養(yǎng)培養(yǎng)基闲招，冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑——氯化三苯基四氮唑（TTC）精幌，菌落在測試片上呈紫紅色或粉紅色，這樣可縮短計(jì)數(shù)時(shí)間和增強(qiáng)計(jì)數(shù)效果蒿疲。本產(chǎn)品適合于食品及水中菌落總數(shù)的測定犯暮，也可用于與食品接觸的容器操作臺(tái)和其他設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測。 2 樣品處理與稀釋 2.1 生活飲用水：取充分混勻的水樣（原液）檢測棉玻。 2.2 水源水：以無菌操作方法吸取1mL充分混勻的水樣泣储，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，混勻成1:10稀釋液列汽。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL朦晋，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)愧橄，振搖后成為1:100的稀釋液喳律，以此類推，做出1:1000等稀釋度的稀釋液瘪期，每次換一支吸管赤朽。 2.3 食品：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，充分混勻成1:10稀釋液昆码。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL气忠，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的稀釋液赋咽，以此類推旧噪，做出1:1000等稀釋度的稀釋液，每次換一支吸管脓匿。 3 接種：將菌落總數(shù)測試片（BB202）置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)面淘钟，揭開上層膜準(zhǔn)備接種。生活飲用水陪毡、純水和礦泉水取原液米母，每個(gè)樣品做兩片；水源水以及食品選擇2～3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測毡琉，每個(gè)稀釋度同時(shí)應(yīng)做一平行接種铁瞒。以無菌操作方法用滅菌吸管吸取1mL混勻的樣品液妙色，慢慢均勻地滴加到測試片上，然后再將上層膜緩慢蓋下慧耍，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固身辨，zui后用手輕輕地壓一下。每次檢測了赖，同時(shí)將1mL滅菌生理鹽水滴加到另一片測試片上作為空白對照树吏。 4 培養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)缚粮，堆疊片數(shù)不超過12片漫介。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h觀察結(jié)果囊叛。 5 結(jié)果判讀: 細(xì)菌在測試片上生長后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn)赏碑，選擇菌落數(shù)適中（10～100個(gè)）的測試片進(jìn)行計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升（克）樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)学蟀。作菌落計(jì)數(shù)時(shí)射愧，可用眼睛直接觀察，必要時(shí)用放大鏡檢查户虐，以防遺漏卓俱。在記下各測試片菌落數(shù)后，應(yīng)求出同稀釋度的平均菌落數(shù)紊荞，供下一步計(jì)算時(shí)用庶艾。 6 計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 6.1通常選擇菌落在10～100個(gè)之間的測試片進(jìn)行計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表1實(shí)例1）擎勘。 6.2若有兩個(gè)稀釋度的菌落數(shù)在10～100個(gè)之內(nèi)咱揍，兩者的比值小于2，則取其平均數(shù)棚饵，若大于2煤裙，則用值小者（見表1實(shí)例2、例3）噪漾。 6.3若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)都有在10～100個(gè)之內(nèi)硼砰，應(yīng)選擇二個(gè)低數(shù)值的平均數(shù)（見表1實(shí)例4）。 6.4若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)均小于10個(gè)或大于100個(gè)時(shí)欣硼，應(yīng)重新試用更低或更高的稀釋度進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)题翰；或采用均小于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui小值，或采用均大于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui大值（見表1實(shí)例5分别、例6）遍愿。 6.5若所有稀釋度的測試片均無生長，以未檢出報(bào)告之耘斩。菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)按實(shí)有數(shù)報(bào)告淌影，大于100時(shí)游隅，采樣兩位有效數(shù)字，在兩位有效數(shù)字后面的數(shù)值脾韧，以四舍五入方法計(jì)算腊的，為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)也可用10的指數(shù)來表示。 表1 稀釋度選擇及菌落總數(shù)報(bào)告方式
7 表面取樣方法：加1mL滅菌生理鹽水在測試片上，靜置至少1h使培養(yǎng)基凝固言刨；提起上層膜泌景，使中央濾紙部分貼到待測物表面，用手在外側(cè)輕壓焦伸；然后將上蓋膜合上坑匆，置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。 六服筋、飲用水大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說明（五管法） 1 適用范圍：適用于飲用水中總大腸菌群的快速檢驗(yàn)跌褂。 2 方法原理：將乳糖、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上午磁，經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽性尝抖，記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)迅皇。 3操作方法 3.1用滅菌吸管吸取10mL水樣插入裝有大紙片的塑料薄膜袋中昧辽，均勻涂布，共做5個(gè)重復(fù)喧半； 3.2將接種好的紙片平放于培養(yǎng)箱中奴迅，36℃±1℃青责，培養(yǎng)15～24h觀察結(jié)果挺据。 3.3觀察每片顏色變化，若紙片保持紫藍(lán)色不變?yōu)榇竽c菌群陰性脖隶，紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)或片狀紅暈為大腸菌群陽性扁耐。 3.4根據(jù)陽性反應(yīng)紙片數(shù)，查MPN表得出水樣中總大腸菌群的MPN值（見表2）产阱。如所有紙片均為陰性時(shí)婉称，可報(bào)告總大腸菌群未檢出。 3.5 對于陽性紙片构蹬，應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群甩幔。用無菌鑷子在陽性菌斑處挑取少許帶菌濾紙，用3mL無菌水混勻祠喻，接種到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上栽乘，進(jìn)行44.5℃培養(yǎng)和檢驗(yàn)芽贫。 表2 用5份10mL水樣時(shí)各種陽性和陰性結(jié)果組合時(shí)的zui可能數(shù)（MPN）
七、水質(zhì)大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說明（十五管法） 1 適用范圍：適用于水源水中總大腸菌群的快速檢驗(yàn)挚粱。 2 方法原理：將乳糖吴爵、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上，經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽性惊柱，記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽性紙片數(shù)错猬，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。 3操作方法 3.1 用滅菌吸管吸取10mL水樣插入裝有大紙片的塑料薄膜袋中樱凄，均勻涂布标炭，共做5個(gè)重復(fù)；分別取1mL水樣加到小紙片中戈弧，共接5個(gè)重復(fù)涕克；另取1mL水樣加到9mL無菌水中混勻，用1mL滅菌吸管分別吸取1mL（即0.1mL水樣）,加到zui后5片小紙片中悬襟。 3.2將接種好的紙片平放于培養(yǎng)箱中衅码，36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h觀察結(jié)果脊岳。 3.3 觀察每片顏色變化逝段，若紙片保持紫藍(lán)色不變?yōu)榇竽c菌群陰性，紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)或片狀紅暈為陽性割捅。 3.4 根據(jù)每個(gè)稀釋度的陽性反應(yīng)紙片數(shù)奶躯，查MPN表（表3）可得出水樣中總大腸菌群的MPN值。 3.5 對于陽性紙片亿驾，應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群嘹黔。用無菌鑷子在陽性菌斑處挑取少許帶菌濾紙，用3mL無菌水混勻莫瞬，接種到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上儡蔓，進(jìn)行44.5℃培養(yǎng)和檢驗(yàn)。 八疼邀、總大腸菌群檢測試劑盒使用說明 1.適用范圍：適用于二次供水喂江、自來水、水源水沛野、生活飲用水莱腾、礦泉水等樣品中總大腸菌群檢測。對污染較嚴(yán)重的樣品采用十五管法含话，其它可采用五管檢測法途陵。 2.方法原理：與國標(biāo)法相同。事先將乳糖蛋白胨培養(yǎng)基雙料、乳糖蛋白胨培養(yǎng)基單料濃縮至試劑盒培養(yǎng)孔中脚们，隨時(shí)取用庵窄。 3.操作方法： 3.1十五管法：用無菌吸管吸取5個(gè)10mL水樣分別加入到試劑盒1號～5號5個(gè)大發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。吸取5個(gè)1mL水樣分別加入到試劑盒7號～11號5個(gè)小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)婉烈。吸取5個(gè)用滅菌生理鹽水稀釋后的1:10稀釋液1mL加入到試劑盒12號～16號小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)炉展。余孔可做對照。 3.2 五管法: 用無菌吸管吸取5個(gè)10mL水樣分別加入到試劑盒1號～5號5個(gè)大發(fā)酵培養(yǎng)基管（孔）內(nèi)巩蕊。余孔可做對照聪磁。 3.3 排氣泡:加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在，可將試劑盒以30～45度角傾斜使氣泡排出塑验，必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)次排出氣泡瞎暑。 3.4 培養(yǎng)：將加樣后的試劑盒置36℃± 1℃溫箱中，培養(yǎng)18h～24h与帆。 3.5 觀察結(jié)果：樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸了赌、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣，產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽性結(jié)果玄糟，可根據(jù)試劑盒的陽性管數(shù),參照國標(biāo)GB/T5750.12-2006的方法勿她，查表 MPN檢索表（表2或 表3），報(bào)告每100mL水樣中的總大腸菌群zui可能數(shù)阵翎。如需對陽性結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)逢并，可參考GB/T5750.12-2006方法進(jìn)行。如所有管數(shù)均為陰性時(shí)郭卫，可報(bào)告總大腸菌群未檢出砍聊。 4. 注意事項(xiàng)： 4.1加入樣品后不需搖勻，平拿平放贰军。 4.2 加樣時(shí)可用一次性無菌塑料吸管玻蝌，將樣品稀釋液加至試劑盒所標(biāo)刻度處。 4.3 在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)應(yīng)平托出來词疼，不要傾斜以免由于試劑盒的傾斜將陽性管集氣窗中的氣泡排出而影響結(jié)果摇致。 4.4 試劑盒為一次性無菌用品，供一次性使用柒谈。 表3 十五管法總大腸菌群（MPN）檢索表 （總接種量55.5 mL穴阱，其中5份10 mL水樣，5份1mL水樣胖辨，5份0.1 mL水樣）
續(xù)表
續(xù)表
九呻引、大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片使用說明 1.適用范圍：適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢驗(yàn) 2.方法原理：耐熱大腸菌群（thermotoletant coliform bacteria）是總大腸菌群的一部分．將培養(yǎng)溫度提高到44～45℃狱林，在此條件下仍能生長和發(fā)酵乳糖的菌群被稱為耐熱大腸菌群尖坤。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬持际、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成蚂兴。其中大腸埃希氏菌（E.coli） 是zui準(zhǔn)確和專一的糞便污染指示菌球垂。與總大腸菌群相比熄阻，耐熱大腸菌群在水體中的檢出斋竞，說明水體更為不清潔，存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大秃殉。大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片運(yùn)用酶底物技術(shù)坝初，含有大腸埃希氏菌*葡萄糖醛酸酶（glucuronidase）的顯色底物（XGLUC/blue），以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶（galactosidase）的顯色底物（SalmonGal/red）,經(jīng)過44.5℃培養(yǎng)后钾军，大腸埃希氏菌顯紫藍(lán)色鳄袍，紅色或紫藍(lán)色菌斑都屬耐熱大腸菌群。 3操作方法 3.1對于大腸菌群檢驗(yàn)顯示陽性的紙片或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管吏恭，用接種環(huán)挑取菌液拗小，轉(zhuǎn)入2－3mL無菌水中混勻，用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上樱哼，然后放下上層膜十籍，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下唇礁。 3.2將接種好的紙片平放于培養(yǎng)箱中勾栗，44.5℃培養(yǎng)15～24h觀察結(jié)果。 4 結(jié)果判讀: 測試片上出現(xiàn)紅色或紫藍(lán)色菌斑都是耐熱大腸菌群陽性盏筐，其中紫藍(lán)色為大腸埃希氏菌陽性幌侧。沒有紅色或紫藍(lán)色斑點(diǎn)為陰性結(jié)果。 十规学、致病菌檢測試劑盒使用說明 1適用范圍：適用于生活飲用水整栏、水源水及食品中致病性沙門氏菌、金黃色葡萄球菌橡周、副溶血弧菌碗昭、致瀉大腸埃希氏菌（含腸出血性大腸桿菌O157:H7）、臘樣芽孢桿菌膊向、板奇腸桿菌檢測的檢測以及大腸菌群污染程度的檢測体笨。 2方法原理：依據(jù)國標(biāo)GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法，采用包被技術(shù)將相對應(yīng)培養(yǎng)基包被在試劑盒底部糙娃，隨時(shí)取用烧啊。 3樣品稀釋：同國標(biāo)法赐汤。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液端杂。 4致病菌檢測 4.1加樣：用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml～10 ml（不得少于4ml）分別加入到標(biāo)號為1刨紊、2、3纬傲、A满败、B、C的增菌格（孔）內(nèi)叹括。加樣后的1算墨、2、3號分別為副溶血弧菌领猾、致瀉大腸埃希菌米同、板奇腸桿菌增菌液；A摔竿、B面粮、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門菌继低、臘樣芽孢桿菌增菌液熬苍。 4.2培養(yǎng)：將加樣后的試劑盒蓋上蓋，平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18小時(shí)袁翁。 4.3 觀察結(jié)果：如果某致病菌的增菌液發(fā)生渾濁柴底，即預(yù)示含有此種致病菌】祝可按國標(biāo)法進(jìn)一步檢測牺闪。也可取陽性菌液1mL，加入到含有9 mL滅菌生理鹽的試管內(nèi)篱汤，混勻扼漓，取1mL，接種到相對應(yīng)的測試片上铃越，36℃±1℃培養(yǎng)18小時(shí)加以驗(yàn)證醒屠。 5大腸菌檢測 5.1加樣：將試劑盒放在試驗(yàn)臺(tái)面上，打開盒蓋切锈，用滅菌吸管分別吸取3個(gè)原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號為4橘谐、5、6的小培養(yǎng)基孔內(nèi)尿旅。另用滅菌吸管分別吸取3個(gè)1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號為7陋疑、8、9的小培養(yǎng)基孔內(nèi)洪稿，標(biāo)號為10的小培養(yǎng)基孔內(nèi)可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養(yǎng)基陰性對照孔使用谭央。 5.2排氣泡：加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在狠持，可將試劑盒以30～45度角傾斜使氣泡排出疟位，必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)下排出氣泡瞻润。 5.3培養(yǎng)：將加樣后的試劑盒蓋上蓋，平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18～24小時(shí)甜刻。 5.4觀察結(jié)果：樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸绍撞、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣，產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽性結(jié)果得院，陽性結(jié)果的孔數(shù)越多傻铣，說明污染越嚴(yán)重。 6 注意事項(xiàng) 6.1致病菌檢測與大腸菌檢測可同時(shí)進(jìn)行祥绞；加入樣品后不需搖勻非洲；大腸菌檢測培養(yǎng)前一定要排氣泡，排氣泡的方法與結(jié)果觀察可參見中大腸菌試劑盒使用說明中的圖像顯示蜕径；在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)注意平托出來两踏，避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽性集氣窗中的氣泡流失而影響結(jié)果判斷。 6.2試劑盒為一次性無菌包裝用品兜喻，供一次性即開即用梦染，。 7 保存條件和有效期：避光保存于陰涼干燥處硫缓，溫度為2～8℃抄刁，有效期18個(gè)月。 十一恭隧、沙門氏菌測試片使用說明 1適用范圍及原理：適用于生活飲用水祈哆、水源水及食品等中沙門氏菌的檢測以及突發(fā)事件應(yīng)急需要。沙門氏菌屬腸道細(xì)菌科啃极，包括那些引起食物中毒帆速、導(dǎo)致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細(xì)菌苗圃。能引起食物傳播性疾病谣泄，近年來，已經(jīng)成為zui常見的食物中毒原因惫饲。腸炎沙門氏菌感染通常源于奶制品褂圣、禽產(chǎn)品和肉產(chǎn)品；雞肉和雞蛋尤其是高風(fēng)險(xiǎn)食品裤础。沙門氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現(xiàn)問題懊悯，包括惡心、腹部絞痛梦皮、嘔吐和腹瀉炭分，一般zui多持續(xù)7天桃焕。在免疫力低下的人群中，如果不及時(shí)服用抗生素類藥品捧毛，沙門氏菌感染將導(dǎo)致生命危險(xiǎn)观堂。沙門氏菌測試片（Salmonella Count Plate BS205）含有選擇性培養(yǎng)基、沙門氏菌*辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠呀忧，運(yùn)用微生物測試片專有技術(shù)师痕，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品，一步培養(yǎng)15-24h就可確認(rèn)是否帶有沙門氏菌而账。 2 操作方法 2.1 樣品處理：生活飲用水及其水源水取原液胰坟。其他樣品取 25g（mL）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液泞辐。 2.2 接種：將沙門氏菌測試片（BS205）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面笔横，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上咐吼，然后再將上層膜緩慢蓋下要茴，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下赦锰，每個(gè)樣品接種兩片息队。 2.3 培養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)灼址，堆疊片數(shù)不超過12片沿硕。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h肤轿。 3 結(jié)果判讀: 對測試片進(jìn)行觀察依特，呈紫紅色的菌落為沙門氏菌；呈藍(lán)色的菌落為其他菌群度籍。出現(xiàn)陽性菌落的樣本契畔，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次碌掩。 4 附加說明 4.1有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明课丢，接純菌種（包括硫化氫陰性菌株）可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑，其他腸桿菌呈藍(lán)色步氏，葡萄球菌不生長响禽。 4.2測試片具有較強(qiáng)的敏感性，在1.5×10-8稀釋時(shí)仍可計(jì)算出菌落荚醒。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰芋类，復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%（中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2006,16（8）：954-955.）。 4.3注意使用過的測試片上帶有活菌界阁，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 侯繁。 十二胖喳、金黃色葡萄球菌測試片使用說明 1適用范圍及原理：適用于生活飲用水、水源水及食品等中金黃色葡萄球菌的檢測以及突發(fā)事件應(yīng)急需要贮竟。金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus簡稱金葡菌）是人類zui常見的致病菌之一丽焊，其侵襲力很強(qiáng)，能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如：腸毒素坝锰、凝固酶等粹懒；可引起化膿性炎癥重付、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎顷级。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問題，我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報(bào)道涵店。金黃色葡萄球菌測試片（Staph Count Plate BT206）含有選擇性培養(yǎng)基和專一性的酶顯色劑裁国，運(yùn)用微生物測試片專有技術(shù)，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品卫跺，一步培養(yǎng)15-24h就可確定出病原菌的存在表季。 2 操作方法 2.1 樣品處理：：生活飲用水及其水源水取原液。其他樣品取 25g（mL）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)钥忌，制成1:10的樣品勻液虏淤。 2.2 接種：將金黃色葡萄球菌測試片（BT206）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜虏爸，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上舶惕，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固角雅，zui后用手輕輕地壓一下饶几，每個(gè)樣品接種兩片。 2.3 培養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中材光，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)暮态，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃谍椅，培養(yǎng)15～24h误堡。 3 結(jié)果判讀:紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌；呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群雏吭。出現(xiàn)陽性菌落的樣本锁施，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次思恐。 4 附加說明 4.1有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明沾谜，金黃色葡萄球菌測試片接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑，普通大腸桿菌呈藍(lán)色菌落胀莹，而沙門氏菌基跑，變形桿菌在測試片上不生長婚温。測試片的敏感度為1.2×10-8。通過檢測211份糕點(diǎn)媳否、熟肉栅螟、鮮肉和奶制品樣品，測試片法和國標(biāo)法的陽性率分別為10.43％和7.58％（中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2007篱竭，17（8）：1456－1457.）力图。 4.2山東省疾病預(yù)防控制中心的驗(yàn)證結(jié)果表明，當(dāng)金黃色葡萄球菌在0～9個(gè)菌落范圍內(nèi)時(shí)厘乱，測試片與血平板均能檢出雅跺，作為致病菌不得撿出的標(biāo)準(zhǔn)要求，可以作為金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)應(yīng)用潭女。 4.3注意使用過的測試片上帶有活菌枕篡，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。 十三捍秃、副溶血弧菌測試片使用說明 1適用范圍及原理：適用于生活飲用水生香、水源水及食品等中副溶血弧菌的檢測以及突發(fā)事件應(yīng)急需要。副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細(xì)菌印洒，海產(chǎn)品中常有此菌藐病，它是引起食源性疾病的主要病原之一，是夏瞒谱、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原赏庙。據(jù)國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)統(tǒng)計(jì)，我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢镊鹊，已成為我國一個(gè)嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問題之一填抬。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為：上腹部疼痛、腹瀉隧期、惡心飒责、嘔吐、發(fā)熱等仆潮，腹瀉多為水樣便宏蛉，亦有大便膿血，隨后腹部劇烈疼痛性置，持續(xù)1-2天拾并。副溶血弧菌測試片（BH209）是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有高選擇性培養(yǎng)基鹏浅、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分嗅义，培養(yǎng)15～24小時(shí)就可確認(rèn)是否有病原菌的存在。 2 操作方法 2.1 樣品處理：：生活飲用水及其水源水取原液。其他樣品取 25g（mL）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)之碗，制成1:10的樣品勻液蝙眶。 2.2 接種：將副溶血弧菌測試片（BH209）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜褪那，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上牵深，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固喷围，zui后用手輕輕地壓一下粉越，每個(gè)樣品接種兩片。 2.3 培養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中码杆，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)薄罕，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃扬饰，培養(yǎng)15～24h宛办。 3 結(jié)果判讀: 呈紫紅色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測試片上不生長班跟，少數(shù)能生長，如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌肪误，但菌落呈藍(lán)色板径，明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽性菌落的樣本郎闹，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證疾捍，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。 4 附加說明 4.1 汕頭出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心的對比試驗(yàn)結(jié)果表明栏妖，副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性乱豆，對純菌的檢測靈敏度達(dá)到8cfu/mL，與SN標(biāo)準(zhǔn)方法符合率達(dá)到90%以上吊趾。 4.2 注意使用過的測試片上帶有活菌宛裕，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。 十四论泛、大腸桿菌測試片使用說明 1適用范圍及原理：適用于生活飲用水揩尸、水源水及食品等中大腸桿菌的檢測以及突發(fā)事件應(yīng)急需要。腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現(xiàn)的食物傳播性疾病的病因屁奏。它除引起腹瀉岩榆、出血性腸炎外，還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥坟瓢、血栓性血小板減少性紫癜等嚴(yán)重的并發(fā)癥勇边。自1982年美國*發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來，腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴(kuò)散和蔓延，相繼在英國畴垃、加拿大斟策、日本等多個(gè)國家引起腹瀉爆發(fā)和流行。我國已陸續(xù)有十余個(gè)省份在市售食品采散、進(jìn)口食品胡傅、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7猩琳。大腸桿菌測試片（BO204）采用進(jìn)口高選擇性培養(yǎng)基作為主要原料母烘，加入特異性酶顯色劑，運(yùn)用微生物測試片專有技術(shù)侈兄，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品惨侵，一步培養(yǎng)15～24h就可確認(rèn)。 2 操作方法 2.1 樣品處理：生活飲用水及其水源水取原液版痪。其他樣品取 25g（mL）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)蓉肤，制成1:10的樣品勻液。 2.2 接種：將大腸桿菌測試片（BO204）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面什箭，揭開上層膜棋捷，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下最仑，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固藐俺，zui后用手輕輕地壓一下，每個(gè)樣品接種兩片泥彤。 2.3 培養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中欲芹，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片吟吝。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃菱父，培養(yǎng)15～24h。 3 結(jié)果判讀: 對測試片進(jìn)行觀察剑逃，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157:H7浙宜；呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽性菌落的樣本炕贵，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證梆奈，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。 4 附加說明 4.1本品所用培養(yǎng)基已在國外得到比較廣泛的應(yīng)用称开，有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明亩钟，接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑，靈敏度達(dá)到98%（K.A. Betheim. 1998. J. Clin. Microbiol. 85：425-428）舞涮。 4.2本公司檢測大腸桿菌測試片對純菌的檢測靈敏度為0.5 cfu/mL林慷，3次試驗(yàn)結(jié)果測試片與平皿的符合率平均達(dá)到96.3％。 4.3注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 否胸。 十五芳迅、阪崎腸桿菌測試片使用說明 1 適用范圍：適用于生活飲用水、水源水及食品等中阪崎腸桿菌的檢測以及突發(fā)事件應(yīng)急需要馆梦。 2 方法原理：測試片是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品蕾胶，由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成桐继，一步培養(yǎng)15～24小時(shí)就可確定出目標(biāo)菌的存在刘耀。 3操作方法 3.1樣品處理：生活飲用水及其水源水取原液。其他樣品取 25g（mL）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)蚤弃，制成1:10的樣品勻液召藻。 3.2接種：將測試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜偿尘，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上忆某，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固阔蛉，zui后用手輕輕地壓一下弃舒。每個(gè)樣品接種2片。 3.3 培 養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中馍忽，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)棒坏，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃遭笋，培養(yǎng)15～24h。 3.4 結(jié)果判別: 對測試片進(jìn)行觀察徒探，呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌瓦呼。對于出現(xiàn)陽性菌落的樣品，用其他方法作進(jìn)一步的鑒定测暗。 4 附加說明 4．1阪崎腸桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn)央串，接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門氏菌等時(shí)碗啄，一加樣下去就會(huì)出現(xiàn)有紫色的點(diǎn)或暈狀质和，此為產(chǎn)品本身顯色劑的原因，不影響產(chǎn)品的使用和結(jié)果判讀隅贫；而金黃色葡萄球菌甸诽、大腸桿菌O157和副溶血性弧菌等均被抑制。 4．2本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢做销、中毒樣品和物體表面的檢測所惶，用取樣棉簽涂抹被測物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s桦溃，然后取1mL接種到測試片上晕围。 4．3注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 呐相。 十六黑寻、蠟樣芽胞桿菌測試片使用說明 1 適用范圍：適用于生活飲用水、水源水汞小、食品以及人體體檢樣品中蠟樣芽胞桿菌的檢測晶恨。以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測需要。 2方法原理：采用一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品男窿，含有高選擇性培養(yǎng)基扎运、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分，培養(yǎng)15～24小時(shí)就可確認(rèn)是否有目標(biāo)菌的存在饮戳。 3操作方法 3.1樣品處理：生活飲用水及其水源水取原液豪治。其他樣品取 25g（mL）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液扯罐。 3．2接種：將測試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面负拟，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上歹河，然后再將上層膜緩慢蓋下掩浙，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下秸歧。每個(gè)樣品接種2片厨姚。 3．3培 養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)键菱，堆疊片數(shù)不超過12片谬墙。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h经备。 3．4結(jié)果判別:對測試片進(jìn)行觀察育另，蠟樣芽胞桿菌產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn)，而大部分非目標(biāo)菌如大腸桿菌瞒脆、大腸桿菌O157衷谋、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌纺闷、副溶血性弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制榜寸。 4附加說明 4．1本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測单葡，用取樣棉簽涂抹被測物體表面深境，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中每玛，搖晃10s，然后取1mL接種到測試片上旅雇。 4.2注意使用過的測試片上帶有活菌芦赔，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。 4．3出現(xiàn)陽性菌落的樣本跃旁，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證桥膝，沒有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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