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菌落總數(shù)測試片

：李菲 :

1 適用范圍：可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定母债。也可用于與食品接觸的容器、操作臺和其他設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測尝抖。

2 方法原理：將營養(yǎng)培養(yǎng)基毡们、凝膠和氯化三苯基四氮唑（TTC）顯色劑等加載在試紙片，經(jīng)加樣昧辽、培養(yǎng)后衙熔，細菌菌落在測試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑，通過計數(shù)報告結(jié)果搅荞。

3 操作方法

3.1樣品處理：無菌稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi)红氯，經(jīng)充分振搖（均質(zhì)）做成1:10的稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL咕痛，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)痢甘，用1mL滅菌吸管反復(fù)吸吹制成1:100的稀釋液。以此類推茉贡，做出1:1000等稀釋度的稀釋液塞栅，每個稀釋度更換一支滅菌吸管。

3.2接種：一般食品選2～3個稀釋度進行檢測块仆，含菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用原液檢測构蹬。將測試片放在水平臺面上，揭開上面的透明薄膜饶机，用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL，均勻加到中央的紙片上栽乘，輕輕將上蓋膜放下芽贫，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下挚粱。每個稀釋度接種兩片吴爵。

3.3培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)惊柱，堆疊片數(shù)不超過12片错猬。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃俏妆，培養(yǎng)15～24h。

4 結(jié)果判斷與計數(shù)：

4.1細菌在紙片上生長后會顯示紅色斑點标炭，選擇菌落數(shù)適中（10個～100個）的紙片進行計數(shù)失欢，乘以稀釋倍數(shù)后即為每克（或毫升）樣品中所含的細菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在100以內(nèi)時斑卤，按實有數(shù)報告晨另。大于100時，用二位有效數(shù)字谱姓，二位有效數(shù)字后面的數(shù)字借尿，以四舍五入方法計算，并以10的指數(shù)來表示屉来。

4.2計數(shù)原則與報告方式

4.2.1通常選擇菌落在10個～100個之間的紙片進行計數(shù)路翻，乘以稀釋倍數(shù)報告之（見下表中例次1）。國家標準菌落總數(shù)報告方式術(shù)語為cfu/g或mL茄靠，cfu的含義為菌落形成單位帚桩。

4.2.2若有兩個稀釋度的菌落數(shù)在10個～100個之內(nèi)，兩者的比值小于2嘹黔，則取其平均數(shù)账嚎，若大于2，則采用稀釋度小者報告（見下表中例次2和例次3）儡蔓。

4.2.3若三個稀釋度的菌落數(shù)都有在10個～100個之內(nèi)時郭蕉，應(yīng)選擇二個低數(shù)值的平均數(shù)（見下表中例次4）。

4.2.4 若三個稀釋度的菌落數(shù)均小于10個或大于100個時喂江，應(yīng)重新試用更低或更高的稀釋度進行菌落計數(shù)召锈；或采用均小于數(shù)量標準的zui小值，或采用均大于數(shù)量標準的zui大值（見下表中例次5和例次6）莱腾。

例次	稀釋度			兩稀釋度之比	選定計數(shù) 稀釋度	報告方式（個/g或個/mL）
	10^-1	10^-2	10^-3
1 2 3 4 5 6	158 208 265 98 8 295	76 68 82 50 5 174	5 12 50 15 1 106	— 1.8 6.1 — — —	10^-2 10^-2诅枚、10^-3 10^-2 10^-1、10^-2 10^-1 10^-3	7.6×10³ 9.4×10³ 8.2×10³ 3.0×10³ 8.0×10 1.1×10⁵

5 表面取樣方法：加1mL滅菌生理鹽水在測試片上途陵，靜置至少1h使培養(yǎng)基凝固妥坦；提起上層膜，使中央濾紙部分貼到待測物表面脚们，用手在外側(cè)輕壓房贮；然后將上蓋膜合上，置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)鳖路。

6 注意事項：使用過的紙片上帶有活菌殊蜓，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。

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